MAR-тест, IgG (количественное определение наличия/отсутствия антиспермальных антител класса G с использованием латексных частиц на поверхности сперматозоидов, Mixed agglutination reaction)
Метод определения
Исследование нативного препарата под микроскопом.
Исследуемый материал
Сперма
Онлайн-регистрация
Внимание! По требованиям Всемирной Организации Здравоохранения MAR-тест без спермограммы не проводится, тест выполняется одновременно с анализом эякулята (см. тест № 599).
Возможно выполнение MAR-тестов на основании раннее полученных результатов спермограммы ( если данные спермограммы выдерживают условия для выполнения MAR-тестов: концентрация и подвижность сперматозоидов), при обязательном предоставлении результата спермограммы, срок давности которой не превышает3х месяцев.
От 30 до 50% причин бесплодия могут быть проблемы мужской патологии. Одной из таких проблем является иммунологическое бесплодие. Оно обусловлено образованием антиспермальной оболочки на поверхности сперматозоида.
Антиспермальные антитела — иммуноглобулины изотипов IgG, IgA и/или IgM. У мужчин они образуются в яичках, их придатках, в семявыносящих протоках и направлены против антиген мембраны разных частей сперматозоида — головки, хвоста, средней части или их комбинации.
Количество таких антител исследуют с помощью MAR-теста (Mixed agglutination reaction). Этот тест определяет отношение (процент) нормальных активно-подвижных сперматозоидов, но покрытых антиспермальными антителами, к общему количеству сперматозоидов с теми же характеристиками. В стандартной спермограмме такие сперматозоиды расцениваются, как совершенно нормальные. Но, на самом деле, они выключены из оплодотворения.
Положительный MAR-тест является условным критерием иммунологического бесплодия у мужчин. По типу исследуемых антител разделяются на MAR IgA и MAR IgG. Исследование целесообразно только при нормальной концентрации и подвижности сперматозоидов. В случае нарушения этих показателей проводится исследование сыворотки крови мужчины на наличие антиспермальных антител (методом ИФА).
Биоматериал (сперма) собирается тем же способом, как и для спермограммы.
Аналитические показатели: антисыворотка связывает IgA/IgG на поверхности активно-подвижных сперматозоидов и образует комплексы, которые можно наблюдать в микроскопе.
Литература
- Андрология. Клинические рекомендации. – М.: Медпрактика, 2007. – 134 С.
- Munuce M. and all. Relationship between Antisperm Antibodies, Sperm Movement and Semen Quality. Urologia Internationalis, 2000, vol. 65, p. 200 — 203.
МАР-тест
МАР-тест: что это такое, для чего он нужен и как его расшифровать?
Спермограмма с MAR-тестом является обязательным исследованием в диагностике мужского бесплодия. Этот вид обследования выполняется с целью более детального изучения фертильности мужчины.
В дополнение к обнаруженной проблеме может добавиться такое состояние, как иммунологическое бесплодие. При стандартной спермограмме определить его невозможно. Распознать патологическое формирование антител можно МАР-тестом. Согласно рекомендациям ВОЗ, выполнять исследование необходимо при каждом анализе состояния спермы.
Для чего нужен MAR-тест, о чем говорит и когда сдается?
Показанием к проведению MAR-теста становится невозможность женщины забеременеть при отсутствии проблем со здоровьем, или подготовка к процедуре ЭКО. Исследование может проводиться также для женщины: сдается – посткоитальный тест или проба Шуварского. Если муж и жена не имеют препятствий для беременности, но зачатие не наступает, то анализ делается для обоих партнеров сразу, что позволяет получить больше информации о фертильном статусе пары, а не каждого в отдельности. Полученные показатели оцениваются комплексно.
О чем говорит MAR-тест?
MAR-тест помогает установить наличие антиспермальных антител (АСАТ) в организме мужчины и женщины. В норме они не должны присутствовать в шеечной слизи у женщин и в сперме у мужчин или обнаруживаться в незначительной концентрации. АСАТ могут определиться у одного или обоих партнеров.
Формирование антител говорит о том, что иммунитет воспринимает половые клетки мужчины чужеродным объектом. В норме генетический материал человека имеет 46 хромосом. Половые клетки, предназначенные для последующего слияния, включают в себя всего 23. Иммунитет, обнаруживая их, начинает активную борьбу с нетипичным набором. Природой задумано так, чтобы защитная система организма не «видела» сперматозоиды, но под влиянием определенных факторов это все же происходит.
Сперматозоиды, находящиеся в яичках защищены от иммунных атак гематотестикулярным барьером. Нарушение целостности барьера приводит к образованию антител к структурам сперматозоида: головке, телу, хвосту. Антитела мешают сперматозоиду двигаться и оплодотворять яйцеклетку.
Нарушение защитного механизма происходит в результате:
- травм;
- инфекционно-воспалительных заболеваний;
- обструкция семявыносящих протоков;
- инфекций, перенесенных в детстве.
Именно МАР-тест позволяет установить запущенный защитный механизм организма и по возможности провести лечение.
MAR-тест и расшифровка полученных результатов
Если врач назначил сдать MAR -тест, то и расшифровывать его должен он. Не стоит пытаться самостоятельно интерпретировать числовые значения. Зачастую складывающееся мнение у пациента о состоянии своей репродуктивной системы бывает надуманным.
Обнаруженные иммуноглобулины с помощью МАР-теста могут быть нескольких видов:
- IgA – антитела, которые отвечают за местный иммунитет и формируются клетками слизистых оболочек;
- IgG – антитела, постоянно присутствующие в организме человека при сформированном иммунном ответе;
- IgM – антитела, являющиеся первоочередными в формировании иммунного ответа, определяются лабораторно только в течение 2 недель после образования.
MAR -тест отрицательный: что это значит?
Если исследование показывает отрицательный результат, то это означает, что мужчина фертилен, а в его сперме нет АСАТ. Титр негативного результата может иметь вариабельность от 0 до 10%. При этом процент количеством от 10 до 50 – тоже норма, но уже сомнительная. При обнаружении показателя АСАТ более 10%, но менее 50% предполагается повторное выполнение МАР-теста в срок не ранее, чем через 2 недели.
Что означает положительный MAR тест?
Если удалось обнаружить в спермограмме количество клеток с антиспермальными антителами, превышающее значение 50%, то естественное зачатие для мужчины затруднено. Несмотря на хорошую подвижность и количественный состав сперматозоидов, клетки не способны к оплодотворению из-за активности АСАТ.
Однако и в этом случае не стоит сдаваться. Есть вероятность того, что зачать ребенка получится после проведенного лечения. Консервативная терапия позволяет уменьшить количество антиспермальных антител и оплодотворяющая способность сперматозоидов увеличивается.
Решение о методе коррекции принимается специалистом. В терапии антиспермальных антител используются: плазмаферез, антиглобулиновая сыворотка, временное использование латексных контрацептивов, а также лекарственные средства и даже хирургические методы. При неэффективности лечения применяются вспомогательные репродуктивные технологии. Эффективно лечить АСАТ можно при помощи ЭКО. При использовании искусственного оплодотворения возможно 2 варианта лечения:
- отмывание сперматозоидов от антител;
- ИКСИ.
Как сдавать анализ мужчине?
Забор материала производится в стенах медицинского учреждения с соблюдением правил асептики. Для пациента процесс сбора спермы ничем не отличается от стандартной спермограммы.
Порядок подготовки для проведения анализа
Предварительная запись на процедуру не требуется
Как часто необходимо сдавать?
Если результат реакции получен сомнительный, то мужчине рекомендуется пересдать анализ через 2 недели. Случается, что причиной такого показателя является несоблюдение условий подготовки. Если генетический материал будет получен в малом объеме или клетки в сперме вовсе будут отсутствовать, то определить количество АСАТ не удастся. При любом сомнении и подозрении на ложный результат пациенту назначается вторичное обследование.
Регулярно сдавать MAR тест нет необходимости. При соблюдении условий подготовки и получении точного результата данные принимаются за правдивые с первого раза.
Дополнительное исследование эякулята, позволяющее выявить число сперматозоидов, которые могут быть покрыты антиспермальными телами, что делает оплодотворение невозможным. При обнаружения 50% и выше сперматозоидов, связанных с антиспермальными антителам ставится диагноз «иммунологическое бесплодие».
Тест на антиспермальные антитела. Что это и для чего он нужен.
MAR-тест назначают для обнаружения антиспермальных антител (АСАТ) классов IgG и IgA в эякуляте. Руководство ВОЗ по исследованию эякулята рекомендует проводить исследование вместе с общей спермограммой. МАР-тест можно выполнить при удовлетворительном качестве и количестве подвижных сперматозоидов.
Показания к исследованию
- • бесплодный брак;
- • подозрение на иммунологические причины мужского бесплодия;
- • подготовка к программам ВРТ.
Что такое АСАТ
Антитело, или иммуноглобулин, — это сложный белок, способный связывать и нейтрализовать определенные вещества, которые распознаются им как чужеродные. Такие вещества называются антигенами. Для каждого из них клетками крови В-лейкоцитами вырабатываются свои специфические антитела.
В естественных условиях компоненты спермы изолированы от крови, а значит и от неблагоприятного воздействия собственной иммунной системы, так называемым гематотестикулярным барьером. Иногда этот барьер разрушается, например, вследствие воспалительных заболеваний, онкологии, крипторхизма или травм. В результате развивается аутоиммунная реакция — иммунная система обнаруживает новый антиген (элементы сперматозоида), и В-лимфоциты продуцируют антитела к нему. Такие иммуноглобулины называются антиспермальными и могут быть направлены против любого из антигенов сперматозоида. Существует 3 класса АСАТ: IgA, IgG и IgМ, однако последний редко обнаруживается в сперме, поэтому практическую ценность имеет лишь определение иммуноглобулинов А и G.
АСАТ покрывают поверхность мужских половых клеток и способны повлиять на фертильность мужчины несколькими способами:
- • вызвать агглютинацию, то есть слипание сперматозоидов;
- • препятствовать связыванию гамет с zona pellucida — оболочкой, которая окружает яйцеклетку;
- • препятствовать акросомной реакции — механизму, который позволяет сперматозоиду разрушить zona pellucida и проникнуть к яйцеклетке.
MAR-тест относится к прямым тестам, то есть позволяет обнаружить АСАТ непосредственно на сперматозоидах.
Как это работает
MAR-тест проводится на нативном эякуляте. В образец добавляют специальным образом обработанные латексные шарики, которые прилипают к сперматозоидам, что несут на своей поверхности АСАТ. Это постепенно приводит к образованию массивных агглютинатов, которые ограничивают движения гамет. Половые клетки, свободные от АСАТ, будут спокойно перемещаться между ними. Цель исследования — определить процент подвижных сперматозоидов, покрытых антиспермальными антителами.
Оценка результата
ВОЗ рекомендует использовать 50%, как пороговое значение для постановки диагноза «иммунологическое бесплодие». Исследования показали, что превышение этого порога сопровождается ухудшением проникновения сперматозоидов через цервикальную слизь и показателей оплодотворения in vitro (в пробирке). Важно понимать, что MAR-тест не исключает возможности наступления беременности, равно как и не гарантирует ее, но дает представление о возможной причине снижения фертильности. Положительный и отрицательный результат мар-теста — понятия весьма условные, поскольку иногда антиспермальные антитела обнаруживают в сперме у мужчин с доказанной способностью иметь детей. Поэтому результат должен оцениваться опытным андрологии, а само исследование, проведение которого имеет много нюансов, выполняться эмбриологом, имеющим соответствующую подготовку и с соблюдением рекомендаций ВОЗ.
Как подготовиться к исследованию
Мар-тест комбинируют со спермограммой, поэтому мужчина должен соблюдать общие принципы подготовки к исследованию эякулята. Необходимо воздерживаться от интимной близости не менее 2, но не более 7 суток до анализа. Нужно исключить:
- • алкогольные напитки — за 7 суток;
- • массаж простаты — за 3-4 дня;
- • фармакологические средства — за 1 сутки;
- • воздействие высоких температур, в том числе бани или лихорадки — за 1 неделю;
- • физиопроцедуры, рентгеновские исследования — за 3 суток.
Также накануне исследования надо постараться ограничить физические нагрузки и психоэмоциональное напряжение. После перенесенных заболеваний мочеполовой системы желательно выждать 2 недели.
Непрямые тесты на антиспермальные антитела
На некоторых ресурсах можно найти информацию о мар-тесте для женщин и непрямом мар-тесте. Эти понятия не имеют никакого отношения к исследованию эякулята. Mar-тест — «прямой» тест, который подразумевает обнаружение АСАТ непосредственно в сперме и непосредственно на сперматозоидах. Иногда, когда проведение этого метода исследования невозможно, применяют так называемые «непрямые тесты», которые позволяют обнаружить антитела в других биологических жидкостях — в крови, семенной плазме, цервикальной слизи (у женщин). Это другие процедуры, и называть их мар-тестом некорректно.
Сделать МАР-тест в СПб — ICLINIC
Одним из дополнительных методов диагностики мужского фактора бесплодия является мар-тест (mar-test). Это аббревиатура от названия «mixed antiglobulin reaction» (смешанный антиглобулиновый тест). Методика является не требует и проводится по показаниям, в основном в период обследования супругов для уточнения основных причин бесплодия.
Что выявляет мар-тест
Основной задачей мар-теста является диагностика иммунологической формы мужского бесплодия. Он позволяет определять в сперме процент сперматозоидов, которые «выключены» антиспермальными антителами и потому не способны самостоятельно оплодотворять яйцеклетку. Такие спермии визуально не отличимы от остальной массы живых половых клеток в эякуляте. Поэтому-то обычная спермограмма при иммунологическом мужском бесплодии оказывается малоинформативной.
Антиспермальные антитела в норме в организме мужчины не вырабатываются или синтезируются в малых количествах. Их появление свидетельствует о нарушении целостности гематотестикулярного барьера, который отделяет функциональный слой семенных канальцев в яичках от окружающих тканей. В такой ситуации клетки иммунной системы получают возможность контактировать с созревающими сперматозоидами, которые гаплоидны (имеют половинный хромосомный набор) и потому могут восприниматься как чужеродные.
Антиспермальные антитела фиксируются на сперматозоидах и циркулируют в крови. Механизм их негативного действия на оплодотворяющую способность спермы включает:
- нарушение подвижности сперматозоидов, снижение их способности к целенаправленному перемещению;
- изменение функциональной активности мембраны сперматозоидов, блокада расположенных на ней рецепторов для связи с оболочками яйцеклетки;
- провоцирование слипания (агглютинации) спермиев друг с другом;
- цитотоксическое действие на клетки семенных канальцев, что может приводить к уменьшению количества созревающих сперматозоидов;
- провоцирование выработки аналогичных антител в женском организме, с их накоплением преимущественно в цервикальной слизи;
- повреждающее действие на ткани простаты (предстательной железы), что приводит к изменению физико-химических свойств эяулята.
В результате действия антиспермальных антител снижается оплодотворяющая способность спермы, вплоть до развития иммунологической формы супружеского бесплодия.
Кому показано проведение мар-теста
К показаниям для назначения mar-теста относят:
- Диагностированное бесплодие при отсутствии данных за патологию мужской и женской репродуктивных систем.
- Выявление агглютинации сперматозоидов при проведении спермограммы.
- Наличие в анамнезе у мужчины травм мошонки, ЗППП, варикоцеле, орхитов, операций на яичках и придатках. Все это может стать причиной повреждения гематотестикулярного барьера и спровоцировать синтез антиспермальных антител.
- Подготовка супругов к ЭКО и искусственной инсеминации. В данном случае мар-тест позволит определить необходимость использования дополнительных репродуктивных методик для повышения вероятности оплодотворения.
Согласно современным рекомендациям ВОЗ и специалистов ICLINIC, мар-тест целесообразно проводить всем мужчинам в период обследования супругов для выявления причин бесплодия. Показано это исследование и донорам спермы. Кроме того, его можно пройти в период планирования беременности для своевременного выявления иммунологического фактора снижения мужской фертильности.
Когда mar-тест не выполняют
Сдавать мар-тест нецелесообразно при наличии у мужчины ряда выраженных отклонений в спермограмме:
- Малое количество живых сперматозоидов в эякуляте или их полное отсутствие. Речь может идти об азооспермии, олигозооспермии, некрозооспермии.
- Недостаточная подвижность сперматозоидов (астенозооспермия вплоть до акинозооспермии).
- Большое количество морфологически неполноценных спермиев (тератозооспермия).
Мар-тест невозможно провести при выраженной эякуляторной дисфункции и анатомических дефектах полового члена, когда не удается получить порцию эякулята для исследования.
Как сдать мар-тест
Проведение мар-теста подразумевает сдачу спермы. Поэтому подготовка к этому исследованию такая же, как перед спермограммой. Рекомендуется воздерживаться от половых контактов и мастурбации в течение 3 предшествующих суток, исключить посещение сауны, бани, солярия, избегать повышенных физических нагрузок. Желательно также отказаться от приема алкоголя.
Исследование для выявления антиспермальных антител проводится одновременно о спермограммой. Для этого используется только нативная свежесданная сперма, полученная путем мастурбации. Такой вариант мар-теста называется прямым. Он включает несколько этапов:
- Смешивание образца спермы с человеческими антителами, которые фиксированы на частицах-носителях (латексе или эритроцитах). При этом в зависимости от типа проводимого мар-теста могут быть использованы Ig A или Ig G.
- Введение антисыворотки, которая провоцирует реакцию введенных антител с антипермальными антителами на поверхности сперматозоидов.
- Визуальная оценка количества образующихся конгломератов, определение процентного соотношения между склеившимися и оставшимися свободными сперматозоидами.
Тест для выявления антиспермальных антител у мужчины может проводиться не только со спермой, хотя этот способ является предпочтительным. В качестве материала допустимо использовать сыворотку крови, в этом случае тест называется непрямым. У женщин исследованию подвергают цервикальную слизь.
Как интерпретируют результаты
В заключении лаборатории указывается, отрицательный мар-тест или положительный. В последнем случае уточняется процентное содержание сперматозоидов, связанных с антиспермальными антителами. Результат этого исследования обычно выдается одновременно с данными спермограммы. Для их оценки необходимо обратиться к репродуктологу, самостоятельная трактовка показателей может быть некорректной.
Мар-тест положительный: что это значит? Такой результат свидетельствует о том, что более чем 50% активно-подвижных спермиев в порции эякулята «выключены» антителами. Соответственно, они не смогут принимать участие в естественном оплодотворении, несмотря на свою морфологическую и функциональную зрелость. Если у супругов при этом отмечаются проблемы с зачатием, можно говорить об иммунологическом факторе бесплодия. Но такой диагноз может поставить только врач, основываясь на комплексной оценке конкретной клинической ситуации.
Если же мар-тест отрицательный, это значит, что у мужчины нет критического уровня антиспермальных антител. Это является нормой и не требует проведения каких-либо лечебных мероприятий. Супругам рекомендуется продолжить комплексное обследование для выявления причин имеющихся у них бесплодия. И для этого предпочтительно обратиться в специализированное хорошо оснащенное медицинское учреждение.
Клиника репродуктивной медицины ICINIC имеет собственную лабораторию с современным оборудованием, что дает возможность проводить мар-тест и комплекс других необходимых исследований для диагностики бесплодия.
Антиспермальные антитела класса IgA количественно (MAR-тест IgA) в Москве недорого
При сдаче биоматериала до 10:00 результат в день обращения!
Анализ можно сдать только по
адресу:
ул. Новослободская, д. 36/1, стр. 3
Назначение возможно только совместно с исследованием 21.06.002 «Спермограмма в лаборатории»
Адрес: ул.Новослободская, 36/1,стр 3 в будни с 9:00 до 17:00, в субботу с 9:30 до 16:00.
Биоматериал принимается у лиц, достигших 18 лет.
В случае дополнительного назначения исследования урогенитального мазка на инфекции методом ПЦР, рекомендуемый интервал между сдачей спермограммы/спермограммы + MAR-тест и взятием урогенитального мазка — 3 часа.
Одна из причин мужского бесплодия — иммунологические нарушения в организме. Иногда иммунные клетки — B-лимфоциты — вырабатывают против собственных сперматозоидов антитела. Последние представляют собой белки, имеющие различное строение, но общая их функция — защита организма от чужеродных патогенов.
Когда в собственной сперме мужчины образуются иммуноглобулины против его же половых клеток, наступает бесплодие. Пациент не имеет достаточного количества неповрежденных сперматозоидов.
Одним из вариантов аутоантител являются иммуноглобулины класса IgA. Они появляются в эякуляте, если поврежден естественный барьер между кровью и спермой. Это встречается при травмах, после операций или из-за некоторых врожденных аномалий половой системы.
Выявление IgA позволяет определить причину иммунологического бесплодия, провести ее коррекцию оперативным путем. После этого количество белков в эякуляте снижается, и половая функция восстанавливается. Для теста используется мужская сперма, которая проверяется с помощью реакции смешивания иммуноглобулинов. Этот анализ называется MAR-тест.
Интерпретация результатов
Расшифровать анализ довольно просто, однако выводы на его основе должен делать лечащий врач. Специалист соотнесет данные с клинической картиной и сможет определить тактику дальнейшего лечения.
Методика определяет содержание в сперме половых клеток, которые имеют на поверхности белок IgA. Он не позволяет им выполнять свои функции, изменяя их морфологические свойства.
Возможные варианты результатов:
- сперматозоидов с IgA меньше 50% — тест отрицательный;
- патологических сперматозоидов больше 50% — тест положительный.
Положительный тест подтверждает причину потери мужчиной фертильности. Отрицательный указывает, что гематоспермальный барьер цел, требуется дополнительная диагностика причины нарушений зачатия.
Показания к назначению теста:
- отклонения в показателях спермограммы;
- бесплодие в супружеской паре;
- иммунологические нарушения репродуктивной системы у мужчин;
- травмы, операции, аномалии строения половых органов.
Приглашаем вас сдать биоматериал на MAR-тест по адресу: Москва, ул. Новослободская, 36/1,стр 3 в будни с 9:00 до 17:00, в субботу с 9:30 до 16:00. Оформите предварительно заказ на удобное для вас время. Обращайтесь!
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЮ ЭЯКУЛЯТА
Рекомендуется воздержаться от половых контактов в течение 3–5 дней до исследования.
- За сутки до исследования ограничить физические нагрузки, нервное перенапряжение, ночные дежурства и прочее.
- Исключить потребление крепкого кофе, чая, копченостей, перца, любых спиртных напитков.
- За неделю до исследования исключить посещение бани и сауны, а также горячие ванны.
Биоматериал для исследования берется до начала антибактериальной терапии или не ранее двух-трех недель после ее окончания. Перед сбором биоматериала необходимо провести туалет наружных половых органов.
ИНСТРУКЦИЯ ДЛЯ ПАЦИЕНТА ПО СБОРУ ЭЯКУЛЯТА
Сбор биоматериала на все виды исследований (спермограмма, молекулярная диагностика (ПЦР), микробиологическое исследование (посев) и др.) осуществляется путем мастурбации в стерильный контейнер без ложки (СК). Сперму необходимо собирать, не касаясь головкой полового члена краев стерильного контейнера.
Антиспермальные антитела IgG в эякуляте (прямой MAR-тест)
Определение антиспермальных антител в комплексе с общей спермограммой для диагностики иммунных причин бесплодия у мужчин. Антиспермальные антитела представляют собой специфические иммуноглобулины, направленные к разным частям сперматозоидов.
Метод исследования
Микроскопия.
Единицы измерения
% (процент).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Эякулят.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Полностью прекратить прием лекарственных препаратов за 24 часа перед исследованием (по согласованию с врачом).
- Исключить половые контакты в течение 72 часов до исследования.
- Не принимать горячую ванну и не посещать сауну в течение 72 часов перед сдачей биоматериала.
- Исключить физиопроцедуры и рентгенологическое обследование за 72 часа до исследования.
- Исключить алкоголь в течение 72 часов до исследования.
Общая информация об исследовании
От 30 до 50% причин бесплодия могут быть проблемы мужской патологии. Одной из таких проблем является иммунологическое бесплодие. Оно обусловлено образованием антиспермальной оболочки на поверхности сперматозоида.
Антиспермальные антитела — иммуноглобулины изотипов IgG, IgA и/или IgM. У мужчин они образуются в яичках, их придатках, в семявыносящих протоках и направлены против антиген мембраны разных частей сперматозоида — головки, хвоста, средней части или их комбинации.
Количество таких антител исследуют с помощью MAR-теста (Mixed agglutination reaction). Этот тест определяет отношение (процент) нормальных активно-подвижных сперматозоидов, но покрытых антиспермальными антителами, к общему количеству сперматозоидов с теми же характеристиками. В стандартной спермограмме такие сперматозоиды расцениваются, как совершенно нормальные. Но, на самом деле, они выключены из оплодотворения.
Положительный MAR-тест является условным критерием иммунологического бесплодия у мужчин. По типу исследуемых антител разделяются на MAR IgA и MAR IgG. Исследование целесообразно только при нормальной концентрации и подвижности сперматозоидов. В случае нарушения этих показателей проводится исследование сыворотки крови мужчины на наличие антиспермальных антител (методом ИФА).
Аналитические показатели: антисыворотка связывает IgG на поверхности активно-подвижных сперматозоидов и образует комплексы, которые можно наблюдать в микроскопе.
Референсные значения:
- 10-39% — есть вероятность наличия иммунологического бесплодия;
- >40% — высокая вероятность наличия иммунологического бесплодия.
Внимание! По требованиям Всемирной Организации Здравоохранения MAR-тест без спермограммы не проводится, тест выполняется одновременно с анализом эякулята.
Возможно выполнение MAR-тестов на основании раннее полученных результатов спермограммы (если данные спермограммы выдерживают условия для выполнения MAR-тестов: концентрация и подвижность сперматозоидов), при обязательном предоставлении результата спермограммы, срок давности которой не превышает3х месяцев.
Вопрос: Яна | 10 Апреля, 2021
Здравствуйте, после сдачи пцр теста на ковид, через какое время будет результат? Где и как его можно получить? И есть ли возможность получения результата на английском языке?
Здравствуйте. Результат обследования готов в течение 24 часов (чаще, уже через 12 часов Вам приходит СМС с кодом посещения и ссылкой, пройдя по которой можно увидеть анализа). Печатную версию результата можно получить в нашем филиале, расположенном по адресу 15 микр дом 8 а. Анализ на английском языке выдаем (не забудьте предупредить об этом администратора)
Вопрос: Дарья | 07 Апреля, 2021
Добрый день)
Подскажите,пожалуйста,если рана находиться в ротовой полости,нужно сдавать пцр тест крови или соскоб в ротовой полости?
Здравствуйте. Из Вашего вопроса непонятно ПЦР на какой вид возбудителя Вам требуется провести. Этот вопрос лучше обсудить с врачом, который рекомендует провести обследование
МАР-тест – диагностика иммунологического бесплодия.
Одной из причин бесплодия являются образующиеся на поверхности
сперматозоидов аутоиммунные антитела Ig A и Ig G. В качестве антигена при
образовании антител могут выступать мембраны различных отделов сперматозоида.
Аутоиммунные антитела образуются в яичках, придатках яичка, в семявыносящих
протоках. Результатом деятельности аутоиммунных антител является образование
оболочки на поверхности сперматозоидов, которая препятствует оплодотворению
женской яйцеклетки. В этом случае строение сперматозоидов не нарушается, а
общее количество активно подвижных сперматозоидов в спермограмме может быть в
норме. Фактически сперматозоиды, несущие на своей поверхности антитела не
участвуют в процессе оплодотворения женской яйцеклетки.
MAR-тест (по-русски — мар тест) — это
отношение (процент) нормальных активно-подвижных сперматозоидов, покрытых
антиспермальными антителами, к общему количеству сперматозоидов с теми же
характеристиками.
MAR-тест показывает процент выключенных из
оплодотворения сперматозоидов, которые в стандартной спермограмме
расцениваются, как абсолютно нормальные сперматозоиды. Положительный MAR-тест
является условным критерием иммунологического бесплодия у мужчин. По типу
исследуемых антител разделяются на MAR IgA и MAR IgG. MAR-тест считается положительным, если активноподвижных
сперматозоидов, покрытых антиспермальными антителами больше 50%. MAR тест -
норма должна быть менее 50%.
Как сдается MAR-тест: Для выяления антиспермальных
антител в сперме сдается эякулят (сперма). По требованиям Всемирной Организации
Здровохранения MAR-тест проводится одновременно с анализом эякулята
(спермограммой). Исследуемый материал (сперма) собирается тем же способом, что
и спермограмма. Можно сразу сдать один эякулят на проведение и спермограммы, и MAR-теста. Для выявления антиспермальных
антител в крови сдается анализ крови (метод ИФА). Подготовки перед сдачей
анализа крови на антиспермальные антитела не требуется. Эти 2 вида МАR- теста:
анализ спермы и анализ крови дополняют друг друга и желательно сдавать эти 2
анализа одновременно. Наиболее оптимальным является одновременная сдача анализа
спермы на спермограмму и 2 вида MAR-теста.
Данное исследование не проводится при аспермии,
азооспермии, астенозооспермии.
SpermMar Test IgG — FertiPro
Аль-Дуджайли С.С., Чакир В.К., Хантуш С.Ф., Прямое исследование антиспермальных антител у бесплодных мужчин , Глобальный журнал медицинских исследований (2012), том 12, № 3
Bohring C., Klepper L., Krause W., Локализация сайтов связывания природных антиспермальных антител на человеческих сперматозоидах с помощью иммунофлуоресценции , Andrologia (2004), Vol.36, pp.286-290
Bohring C., Krause E., Habermann B., Krause W., Выделение и идентификация антигенов мембран сперматозоидов, распознаваемых антиспермальными антителами, и их возможная роль в иммунологическом бесплодии. , Molecular Human Reproduction (2001), Vol.7, №2, стр.113-118
Bohring C., Krause W., Характеристика поверхностных антигенов сперматозоидов с помощью антиспермальных антител и их влияние на акросомный экзоцитоз , Американский журнал репродуктивной иммунологии (2003), том 50, стр. 411-419
Bohring C., Krause W., Характеристика белков мембран сперматозоидов человека — поверхностные антигены и иммунологическое бесплодие , Electrophoresis (1999), Vol.20, pp.971-976
Bohring C., Krause W., Вариация непрямой смешанной антиглобулиновой реакции внутри и между анализами: подходит ли контроль качества? , Репродукция человека (1999), Vol.14, №7, с. 1802-1805
Божедомов В.А., Николаева М.А., Ушакова И.В. и др., Функциональный дефицит сперматозоидов и нарушение фертильности у мужчин с антиспермальными антителами , Журнал репродуктивной иммунологии (2015), том 112, стр.95-101
Chavez-Badiola A., Drakeley A.J., Finney V., et al., Некроспермия, антиспермальные антитела и вазэктомия, Fertility and Sterility (2008), Vol.89, No. 3, pp.723e5-e7
Chiu W.W-C., Chamley L.W., Пролактин-индуцируемый белок семенной плазмы человека представляет собой G-связывающий белок иммуноглобулина , Journal of Reproductive Immunology (2003), Vol.60, стр.97-111
Depuydt CE, Bosmans E., Zalata A., et al., Взаимосвязь между реактивными видами кислорода и цитокинами у андрологических пациентов с инфекцией мужских дополнительных желез или без нее , Journal of Andrology (1996), Vol.17, No. 6. С. 699-707
Depuydt CE, De Potter CR, Zalata A., et al., Уровни фактора роста гепатоцитов / фактора рассеяния (HGF / SF) в семенной плазме пациентов с андрологическими заболеваниями , Journal of Andrology (1998), Vol.19 , No2, с.175-182
Гаролла А., Пиццол Д., Бертольдо А. и др., Ассоциация, распространенность и клиренс вируса папилломы человека и антиспермальных антител в инфицированных образцах спермы от бесплодных пациентов , Фертильность и стерильность (2013), том 99, №1, с.125-131
Гатимел Н., Моро Дж., Исус Ф. и др., Обнаружение антиспермальных антител с помощью модифицированного теста MAR: На пути к лучшему определению его показаний , Репродуктивная биомедицина онлайн (2018), Том 37, № .6, стр. 717-723
Хадинедушан Х., Ghafourzadeh M., Обзор антиспермальных антител в бесплодных парах , Иранский журнал репродуктивной медицины (2007), том 5, № 1, стр. 39-40
Hussein T.M., Elneily D., Eid A.A., Abou-ElKhier H., Оценка антиспермальных антител в образце египетских пациентов с вирусной инфекцией гепатита C , Andrologia (2017), Vol.49, No. e12664
Лаудат А., Бурк-Струксиано Л., Является ли отсутствие спонтанных агглютинатов сперматозоидов в сперме надежным показателем неаутосенсизации против антигенов сперматозоидов человека? , Журнал библиотеки открытого доступа (2016), Vol.3, No. e2978
Lotti F., Baldi E., Corona G., et al., Эпидидимальные аномалии в большей степени, чем тестикулярные, связаны с появлением антиспермальных антител согласно тесту MAR , Human Reproduction (2018), Vol.33, No .8, стр. 1417-1429
Marconi M., Nowotny A., Pantke P., et al., Антиспермальные антитела, обнаруженные с помощью смешанной реакции агглютинации и иммунного теста, не связаны с хроническим воспалением и инфекцией семенного тракта , Andrologia (2008), Vol.40, стр 227-234
Маркони М., Пилатц А., Вагенленер Ф. и др., Действительно ли антиспермальные антитела связаны с доказанными хроническими воспалительными и инфекционными заболеваниями мужского репродуктивного тракта? , Европейская урология (2009), том 56, стр 708-715
Омбелет В., Вандепут Х., Янссен М. и др., Лечение мужского бесплодия с помощью антител к поверхности сперматозоидов: ВМИ или ЭКО? , Human Reproduction (1997), Vol.12, No. 6, pp.1165-1170
Поппе К., Глинер Д., Турне Х., et al., Показан ли систематический скрининг заболеваний щитовидной железы мужчинам с недостаточной фертильностью? , Европейский журнал эндокринологии (2006), том 154, стр. 363-366
Россато М., Галеацци С., Фериго М., Фореста С., Антиспермальные антитела изменяют функциональную целостность плазматической мембраны и ингибируют осмочувствительный приток кальция в сперматозоиды человека , Human Reproduction (2004), Vol.19, No. 8, pp. .1816-1820
Теннакун В., Вирасекера Д.С., Ясавардене С.Г., Успешные исходы беременности после экстракорпорального оплодотворения у бесплодных пар с высоким уровнем антиспермальных антител , Шри-Ланкийский журнал акушерства и гинекологии (2010), Vol.32, стр.47-48
Теннакун В., Ясавардене С.Г., Вирасекера Д.С., Возможные факторы риска образования антиспермальных антител в субфертильной популяции , Шри-Ланкийский журнал акушерства и гинекологии (2011), том 33, стр. 12-19
Верон Г.Л., Молина Р.И., Тиссера А.Д. и др., Распространенность аутоантител на поверхности сперматозоидов и взаимосвязь с обычными параметрами спермы и кинематикой спермы , Am J Reprod Immunol (2016), Vol.76, pp.59-69
Руководство для мужчин
по тестам на сперму | Лечение мужского бесплодия
29 августа 2012 12:31
Может показаться, что мужчинам пренебрегают, когда речь идет о клинике репродуктивной медицины.На самом деле это не так, просто женское бесплодие обычно преодолевается лечением женщины, а мужское бесплодие также часто связано с лечением женского пола, иногда с помощью специально подготовленной или полученной спермы. Основная цель анализа спермы — решить, необходимо ли какое-либо вмешательство, и если да, то выбрать наиболее подходящий способ дальнейших действий. Далее следует краткое руководство по тестам, которые будет проводить лаборатория спермы, с объяснением значения результатов.
Получение образца
Наилучший образец спермы получается после 2–3 дней полового воздержания. Воздержание более 5 дней дает выборку более низкого качества. В идеале образец должен быть получен путем мастурбации в стерильный контейнер, который не является цитотоксичным для сперматозоидов. Важно, чтобы образец спермы был проанализирован вскоре после производства, а также чтобы он не подвергался воздействию экстремальных температур и т. Д. По этим причинам лучше пойти в семинологическую лабораторию и получить образец там.В лаборатории будут выделены специальные помещения для производства образцов спермы, и у них будет опыт деликатного и профессионального решения этих вопросов.
Образец может быть изготовлен в домашних условиях в подходящем контейнере, но в этом случае его необходимо доставить в лабораторию как можно скорее, в идеале в течение часа. Иногда образец можно получить после обычного полового акта с использованием специального презерватива. Этот метод не является предпочтительным из-за значительных потерь и задержек в анализе. Чрезвычайно важно, чтобы использовался только правильный презерватив, поставляемый для этой конкретной цели, обычные презервативы содержат спермициды, которые будут очень вредными для сперматозоидов.
Макроскопическая оценка
Это просто визуальный осмотр и измерение образца. Сначала измеряется объем, который обычно составляет от 1,5 до 5,0 мл. Чтобы создать ощущение масштаба, в чайной ложке содержится около 5 мл жидкости. Далее следует внешний вид образца. Он должен быть белым, возможно, слегка не совсем белым и полупрозрачным, то есть вы не можете видеть сквозь него, но он пропускает свет. Непрозрачный образец может быть признаком инфекции.
Сразу после эякуляции сперма представляет собой вязкую, липкую полужидкость, через которую сперматозоидам довольно трудно плавать.Это эволюционная адаптация к размещению сперматозоидов в одном месте, обеспечивая концентрированную базу для путешествия к яйцеклетке. Примерно через 10 минут сперма подвергается процессу, который биохимически напоминает свертывание крови, за исключением обратного, и сперма становится свободно текущей жидкостью. Этот процесс называется сжижением и обычно указывается в анализе как завершенный или неполный. Неполное разжижение не обязательно является причиной бесплодия, но, как и аномальный объем образца, оно может указывать на функционирование дополнительных половых органов, таких как семенные пузырьки или простата.
Наконец, измеряется pH образца, который должен быть слабощелочным при pH 7,2 или выше. Кислый образец с pH ниже этого может указывать на проблемы, связанные с семенными пузырьками.
Оценка под микроскопом
Первоначальное исследование образца под микроскопом покажет наличие каких-либо клеточных остатков, а также то, свободно ли плавают сперматозоиды или слипаются вместе в сгустки. Любая из этих ситуаций может указывать на инфекцию или травму.Некоторым количеством клеточного мусора можно пренебречь, но высокий уровень агглютинации может повлиять на фертильность.
Количество сперматозоидов
Обычно выражается как количество сперматозоидов на миллилитр (мл) спермы; как таковая это действительно концентрация сперматозоидов. Общее количество сперматозоидов — это концентрация, умноженная на объем (в мл). Минимальная концентрация сперматозоидов, которая считается нормальной, составляет 15 миллионов / мл. Таким образом, мужчина на минимальном конце нормального диапазона концентрации и объема (1.5 мл) будет иметь общее количество сперматозоидов 1,5 x 15 миллионов = 22,5 миллиона сперматозоидов в целом. Концентрация ниже 15 миллионов / мл называется олигозооспермия , объем менее 1,5 мл называется гипоспермия . Как видите, общее количество сперматозоидов чрезвычайно велико, особенно если учесть, что для оплодотворения яйцеклетки требуется только один сперматозоид. Низкое количество сперматозоидов не означает, что вы бесплодны, более низкое количество сперматозоидов может уменьшать шансы на беременность каждый месяц.Несмотря на наличие сперматозоидов, всегда есть вероятность беременности. Шансы на беременность могут быть значительно увеличены за счет вспомогательной репродукции, при которой сперма готовится и обогащается в лаборатории.
Подвижность
Это относится к двум параметрам: количеству активно плавающих сперматозоидов (общая подвижность), выраженному в процентах; и, во-вторых, процент сперматозоидов, которые продвигаются вперед, обычно называемый прогрессивной подвижностью.Некоторые сперматозоиды будут активно плавать, но двигаться по кругу или вращаться вокруг своей оси, что вряд ли приведет их к яйцеклетке. Эти сперматозоиды можно назвать подвижными, но непрогрессивными. Ключевым числом на самом деле являются подвижные и прогрессивные сперматозоиды (плавающие по прямой линии). Медицинский термин, используемый для описания плохой моторики — астенозооспермия . Нижнее значение нормального фертильного диапазона для общей моторики составляет 40%, а для прогрессивной моторики — 32%. Эти цифры кажутся несколько произвольными, и они просто основаны на статистике, но подвижность остается единственным наиболее полезным показателем фертильности.
Сказав это, методы вспомогательной репродукции теперь распространяются на выбор одного сперматозоида и его физическую инъекцию в яйцеклетку. Этот метод называется интрацитоплазматической инъекцией сперматозоидов (ИКСИ), поэтому даже мужчины с нулевой подвижностью могут стать отцами, если можно найти некоторое количество сперматозоидов.
Морфология
Морфология означает просто форму сперматозоидов. Часть образца подготавливается для облегчения визуализации структуры сперматозоидов, чтобы можно было подсчитать долю нормальных сперматозоидов и сперматозоидов, попадающих в четко определенные морфологические группы.Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) устанавливает строгие морфологические критерии, определяющие различные дефекты сперматозоидов, и их обычно упрощают для представления в виде процента сперматозоидов с дефектами головки, средней части или хвоста. Результатом этого является то, что довольно часто только очень небольшая часть сперматозоидов классифицируется как нормальная. Фактически образец спермы считается морфологически нормальным, если 6% сперматозоидов соответствуют нормальным критериям. Другими словами, образец может иметь аномальную морфологию на 94% и при этом оставаться в пределах нормы.
Определения морфологии ВОЗ очень специфичны, поэтому качество спермы может регистрироваться очень точно. Наличие сперматозоидов неправильной формы известно как тератозооспермия . Вполне вероятно, что некоторые из сперматозоидов, которые классифицируются как ненормальные, могут действительно нормально функционировать, но даже если бы это было не так, средний образец спермы, содержащий в общей сложности, скажем, 100 миллионов сперматозоидов, где 94% из них были классифицированы как морфологически аномальные, был бы таковым. все еще доступно 6 миллионов нормальных сперматозоидов!
Жизнеспособность
Жизнеспособность означает долю мертвых или живых сперматозоидов.Конечно, все активно плавающие сперматозоиды живы, но невозможно отличить живую сперму от мертвой среди неподвижных. Это достигается путем смешивания части образца с красителем, который не используется живыми клетками, но может проникать в мертвые клетки, окрашивая их в синий цвет. Результаты представлены как процент живых сперматозоидов. Минимальная жизнеспособность, которая считается нормальной, составляет 58%, а медицинский термин для значений ниже, чем это , некрозоопермия . Тесты жизнеспособности особенно важны в ситуациях, когда подвижность сперматозоидов очень низкая и рассматривается возможность ИКСИ.
Другие клетки
В эякуляте могут быть и другие клетки, в первую очередь белые кровяные тельца (лимфоциты), красные кровяные тельца (эритроциты) или незрелые сперматозоиды. Эритроциты ярко-красного цвета, маленькие и без ядра; их наличие называется гемоспермия и указывает на инфекцию или травму. Точно так же лейкоциты указывают на инфекцию или воспаление, но эти клетки часто трудно отличить от незрелых сперматозоидов.Оба эти типа клеток называются круглыми клетками, и их можно идентифицировать, обнаруживая клетки, которые экспрессируют фермент, называемый пероксидазой. Незрелые сперматозоиды отрицательны на пероксидазу, а большинство иммунных клеток положительно на пероксидазу. Считается, что максимальная концентрация раунда составляет около 1,0 млн / мл.
Антиспермальные антитела
Антитела — это белки, вырабатываемые иммунной системой, которые связываются с чужеродными захватчиками в организме, такими как вирусы и бактерии.Они являются одним из способов, которыми тело различает «я» и «не-я», и мы обычно не ожидаем, что они будут связываться с нашими собственными клетками. Однако яички обычно защищены, и сперматозоиды не контактируют с иммунной системой. Это может произойти в случаях повреждения яичек, повторной биопсии или вазэктомии, а в некоторых случаях мужчина может вырабатывать антитела против собственной спермы.
Тест смешанной антиглобулиновой реакции (MAR) включен в некоторые рутинные анализы спермы, и он может обнаруживать антиспермальные антитела.Результаты обычно выражаются как процент сперматозоидов, связанных антителом, и обычно регистрируются два подкласса антител (IgG и IgA). Все, что меньше 10%, считается отрицательным из-за неспецифического связывания, но нет конкретных эталонных значений для положительного результата. В настоящее время ВОЗ считает 50% или более уровнем, который может повлиять на фертильность, но это значение ожидается до тех пор, пока не появятся дополнительные данные. Проблемы, связанные с антиспермальными антителами, обычно можно успешно преодолеть с помощью ЭКО или ИКСИ.
Что делать, если сперматозоидов вообще нет?
Даже ситуации, когда в эякуляте нет спермы, не безнадежны. Полное отсутствие сперматозоидов называется азооспермия , и если это окажется так, первое, что сделает семинолог, — это центрифугируйте образец спермы, чтобы любые клетки или частицы материала осели в виде осадка на дне пробирки. Затем осадок исследуют под микроскопом, и если в образце есть сперматозоиды, то они будут именно здесь.Обнаружение здесь единственной спермы откроет дверь в ИКСИ. В некоторых случаях сперматозоиды могут подвергаться ретроградной эякуляции в мочевой пузырь, а не составлять часть эякулята, и аналогичный метод центрифугирования может использоваться для извлечения их из образца мочи.
Если предположить, что все это выполнено, а сперматозоиды не обнаружены, остается важная возможность. Одна из основных причин азооспермии — врожденное отсутствие семявыносящего протока. Семявыносящий проток — это структура, которая соединяет яичко с семяпроводами.Примерно у 1-2% мужчин с проблемами фертильности эта структура отсутствует. Эти мужчины обычно производят нормальную сперму, но они не достигают эякуляторных протоков, где они смешиваются с секретами семенных пузырьков и предстательной железы в момент эякуляции. Таким образом, сперма выглядит нормальной, за исключением полного отсутствия спермы. Фактически, любая блокировка нормального пути сперматозоидов, врожденная или приобретенная, может быть устранена путем извлечения спермы из яичек с помощью тонкой иглы с последующей ИКСИ.
Резюме
Анализ спермы дает много информации и требует очень тщательной интерпретации. Параметры, выходящие за пределы нормального диапазона, не обязательно указывают на бесплодие. Иногда низкое количество сперматозоидов или плохая подвижность и т. Д. Могут уменьшать шансы на беременность каждый месяц, но даже если в эякуляте есть сперматозоиды, шансы не равны нулю. Большинство проблем со спермой можно решить с помощью современных методов подготовки спермы. Например, в лаборатории можно выбрать наиболее морфологически нормальные и лучшие плавающие сперматозоиды и ввести их в матку — метод, называемый внутриматочной инсеминацией (ВМИ).В случаях низкого количества сперматозоидов лучшим вариантом может быть экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), когда сперма готовится в лаборатории, а затем смешивается с яйцеклеткой в крошечной капле. Если подвижность низкая или даже когда сперматозоиды не плавают, ответом может быть интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ), при которой в яйцеклетку вводится отдельный сперматозоид. В некоторых случаях, когда сперма в эякуляте отсутствует, сперма может быть получена непосредственно из яичка. Анализ спермы — жизненно важный инструмент в оценке и решении проблем бесплодия пары.
Директор по науке Concept Fertility Clinic www.conceptfertility.comКатегория: Новости
Этот пост был написан Concept Fertility Body
900m00 Testests : Влияние иммунных реакций на фертильность человека 2-е изд.
Иммунное бесплодие: влияние иммунных реакций на фертильность человека 2-е изд.
13.Тесты на антитела к сперматозоидам
Тамер М. Саид 1 и Ашок Агарвал 2
(1)
Андрологическая лаборатория и банк репродуктивной ткани, Институт репродуктивной медицины Торонто (ReproMed), 300-56 Aberfoyle Crescent, Toronto, ON, M8X2W4, Canada
(2)
Американский центр репродуктивной медицины, Кливлендская клиника Медицинский колледж Лернера и Университет Кейс Вестерн Резерв, 9500 Евклид-авеню, стол A19.1, Кливленд, Огайо 44195, США
Тамер М. Саид (Автор для переписки)
Эл. Почта: [email protected]
Ашок Агарвал
Эл. Почта: [email protected]
Аннотация
Было использовано несколько методов для определения наличия антиспермальных антител (ASA). Клиническая значимость результатов, полученных с помощью методов тестирования ASA, широко обсуждается. Противоречивые данные, представленные различными исследователями, могут быть связаны с смешивающими факторами, которые включают использование различных методов тестирования ASA, подготовку образцов и стандарты интерпретации тестов.Кроме того, образцы сперматозоидов динамичны, претерпевают изменения созревания, в том числе емкость и акросомную реакцию, что приводит к изменению эпитопов ASA, поскольку внешняя акросомная мембрана и связанные с ней белки теряются, а антигены, присутствующие на внутренней акросомной мембране, становятся доступными. В настоящее время существует консенсус в отношении того, что результаты тестирования на ASA в семенной жидкости с использованием смешанной антиглобулиновой реакции и тестов на иммунные шарики могут быть в значительной степени связаны с необъяснимым бесплодием.С другой стороны, было обнаружено, что тестирование семенной плазмы или сыворотки менее актуально для оценки фертильности.
13.1 Введение
Антигенность сперматозоидов была впервые выявлена в девятнадцатом веке после инъекции сперматозоидов чужеродному виду. Впоследствии сообщалось, что сперматозоиды также могут быть антигенными при инъекции одному и тому же виду [ 28 ]. Покрытие сперматозоидов антиспермальными антителами (ASA) может существенно повлиять на фертильность.Возможные механизмы включают иммобилизацию сперматозоидов, нарушение проникновения цервикальной слизи, ингибирование емкости и нарушение взаимодействия сперматозоидов и яйцеклеток. Кроме того, ASA связаны с секрецией цитокинов, которые ухудшают функцию сперматозоидов и могут в конечном итоге привести к гибели клеток [ 32 ]. Хотя АСК можно обнаружить в сыворотке крови, не сообщалось, что они ухудшают фертильность, если они не присутствуют в репродуктивном тракте или не обнаруживаются на живых сперматозоидах [ 11 ].
Было описано несколько методов обнаружения ASA. Они включают тест агглютинации на предметных стеклах (TSAT), тест агглютинации желатина (GAT), тест иммобилизации сперматозоидов (SIT), тест на иммунные шарики (IBT) и тест на смешанную антиглобулиновую реакцию (MAR) с использованием сенсибилизированных эритроцитов. Несмотря на разнообразие доступных методов тестирования, Специальная программа Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) по научным исследованиям и обучению в области репродукции человека рекомендует только тест MAR или IBT для оценки спермы человека [ 37 ].
Существуют значительные разногласия между различными методологиями тестирования и их клиническим значением в отношении бесплодия. Существующие данные не подтверждают широкое использование иммунного тестирования в клинической практике. Кроме того, варианты лечения ASA не имеют подтвержденных преимуществ и могут даже иметь отрицательные эффекты [ 23 ]. Ранее сообщалось, что рутинное использование тестирования ASA может иметь некоторое преимущество в экономии затрат по сравнению с расходами, возникающими во время циклов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) [ 5 ].Обнаружение АСК считалось показанием для интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ) по сравнению с обычным ЭКО, поскольку было показано, что это дает более высокие показатели оплодотворения [ 8 ]. Тем не менее, не было признано, что плановое ЭКО и ИКСИ одинаково полезны в случаях с диагнозом АСК.
13.2 Сайты различных классов антиспермальных антител
Антиспермальные антитела IgM обнаружены в обращении мужчин; однако следов молекул IgM в мужских половых путях обнаружено не было.Следовательно, тестирование класса IgM не представляет ценности в контексте оценки мужской фертильности [ 35 ]. С другой стороны, 1% сывороточного IgG был зарегистрирован в мужских половых путях. Присутствие семенного IgG могло быть результатом транссудации из кровообращения или могло быть связано с местной выработкой антител [ 17 ]. Что касается класса IgA в сперме человека, он, по-видимому, является результатом местного производства, поскольку IgA семенной плазмы относится к секреторному типу IgA [ 38 ].
13.3 Методы испытаний
Было разработано несколько тестов для обнаружения и количественного определения ASA, которые можно разделить на группы в зависимости от источника антигена: (a) анализы живых сперматозоидов, такие как макроагглютинация, микроагглютинация, цитотоксичность или тесты взаимодействия сперматозоидов и цервикальной слизи; и (b) фиксированные анализы сперматозоидов, такие как иммунофлуоресценция, иммуноферментный анализ и радиоиммуноанализ, а также смешанные тесты на антиглобулины [ 4 ]. В настоящее время тест на смешанную антиглобулиновую реакцию и тест на иммунные шарики — единственные тесты, которые обычно проводятся диагностическими лабораториями [ 37 ].
13.3.1 Макро / микроагглютинация и иммобилизация
Был описан макроскопический подход для определения наличия ASA в сыворотке. Тест на агглютинацию желатина (GAT) проводят путем суспендирования семенной жидкости донора, у которого, как известно, нет ASA, с инактивированной комплементом сывороткой пациента с подозрением на субфертильность в желатиновой смеси. Агглютинаты сперматозоидов на дне желатиновой смеси можно интерпретировать как положительные [ 26 ]. Известно, что тест GAT выявляет ложноположительные результаты из-за наличия остатков в семенной плазме.Таким образом, это больше не играет роли в диагностике иммунологического бесплодия, тем более, что клиническая значимость АСК в сыворотке сейчас активно обсуждается. Аналогичный тест, тест агглютинации на предметных стеклах (TSAT), выполняется путем смешивания донорской спермы с инактивированной комплементом сывороткой пациента с последующим обнаружением агглютинации сперматозоидов с помощью микроскопической капли [ 16 ]. TSAT также больше не рекомендуется в качестве метода тестирования.
Процедура теста иммобилизации сперматозоидов (SIT) напоминает TSAT, но в качестве источника комплемента добавляют меньшие объемы сыворотки кролика или морской свинки.Во время микроскопической оценки определяется количество подвижных сперматозоидов, и тест считается положительным, если более половины подсчитанных сперматозоидов оказываются неподвижными [ 21 ]. В дополнение к недостаткам, отмеченным выше для GAT и TSAT, SIT не обладает способностью обнаруживать IgA, поскольку фиксация комплемента и инициация каскадной последовательности возможны только для антител классов IgG и IgM [ 6 ].
13.3.2 Тесты на цервикальную слизь
Наличие ASA в цервикальной слизи можно оценить с помощью тестов взаимодействия сперматозоидов и слизи in vivo или in vitro.Посткоитальный тест in vivo (ПКТ) проводится путем взятия пробы цервикальной слизи через несколько часов после полового акта и исследования ее на наличие сперматозоидов. Наличие менее десяти сперматозоидов / HPF можно интерпретировать как плохой результат. Наиболее важно то, что наличие характерного «дрожащего» паттерна подвижности сперматозоидов указывает на присутствие ASA [ 31 ]. И IgG, и IgA можно найти в цервикальной слизи. Хотя PCT показывает плохие результаты в присутствии ASA, причиной могут быть также технические проблемы; Таким образом, следует с осторожностью относить низкий уровень ПКТ к иммунологически враждебной слизи.
Тест контакта сперматозоида и цервикальной слизи in vitro (SCMC) также можно использовать для оценки присутствия АСК в цервикальной слизи. Во время SCMC аликвоты цервикальной слизи и жидкой спермы смешиваются и исследуются на предмет характерного «дрожащего» паттерна подвижности сперматозоидов. Тест считается положительным, если более 25% сперматозоидов демонстрируют паттерн дрожания подвижности. В исследовании 17 пар, которые неоднократно демонстрировали неожиданно плохие посткоитальные тесты, 15 из них показали положительный тест SCMC [ 15 ].Таким образом, тест SCMC можно рассматривать как надежный скрининговый тест для выявления ASA среди бесплодных пар.
13.3.3 Иммунофлуоресценция и иммуноферментный анализ
Метод иммуноферментного анализа (ELISA) был адаптирован для количественной оценки присутствия ASA. ELISA сочетает в себе специфичность реакции антиген-антитело с непрерывным расщеплением хромогенного субстрата ферментом для усиления чувствительности реакции.В качестве вариантов процедуры ELISA использовались многочисленные материалы и методы: твердофазные материалы (силиконовый каучук, стекло), носители (пробирки, шарики, диски), ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена), субстраты (п-нитрофенилфосфат). , и различные промывочные растворы [ 3 ]. Другие переменные включают концентрацию сперматозоидов, тип фиксации сперматозоидов, блокирующие агенты, разведения сыворотки и семенной плазмы. Сложность, инструментарий и дороговизна ELISA не позволили широко использовать его в диагностике мужского иммунологического бесплодия.
Сообщалось об использовании проточной цитометрии для обнаружения антител, связанных со сперматозоидами, и для количественного определения количества антител в сперматозоидах (молекулы антител / сперматозоиды). После окрашивания промытых образцов спермы мертвые сперматозоиды исключают с помощью конъюгированных с флуоресцеином-изотиоцианатом F (ab ’) 2 -фрагментов антител против IgG и IgA с использованием калибровочных стандартов. Проточная цитометрия потенциально надежна и объективна для количественного определения антител к сперматозоидам; таким образом, количество антител к сперматозоидам можно использовать для сравнения разных пациентов или для отслеживания прогрессирования одного и того же пациента [ 25 ].Подобно ELISA, проточная цитометрия в настоящее время не используется широко для обнаружения ASA из-за ее сложности, дороговизны и требований к оборудованию. В том же контексте анализ радиоактивно меченных антител агглютинина для обнаружения и количественного определения ASA имеет ограниченное применение. Этот метод также ограничен невозможностью определить конкретное местоположение ASA, расходы и зависимость от высококвалифицированной рабочей силы [ 18 ].
13.3.4 Тест на смешанную антиглобулиновую реакцию (MAR)
Тест MAR был разработан для обнаружения поверхностного ASA [ 22 ].Он основан на модификации знаменитого теста Кумбса, который был описан в 1956 году Кумбсом и др. [ 8 ]. Простая первоначальная версия анализа заключалась в смешивании трех ингредиентов в виде одной капли и покрытии их покровным стеклом. Образец спермы смешивают с суспензией резус-положительных эритроцитов человека группы О типа R 1 R 2 , сенсибилизированных человеческим IgG в дополнение к кроличьим или козьим, неразбавленным, моноспецифическим анти-IgG антисывороткой. Затем реакцию наблюдают через 10 мин инкубации.Поскольку эритроциты покрыты IgG, а также сперматозоиды, если на них есть антитела, добавленная анти-IgG антисыворотка свяжет вместе два типа клеток. Под световым микроскопом агглютинацию можно увидеть в виде смешанных скоплений сперматозоидов и эритроцитов с медленным «шатким» движением.
Результаты теста MAR указаны как процент подвижных сперматозоидов, включенных в смешанные агглютинаты. Также можно отметить место прикрепления. Интерпретация теста не давалась, если не наблюдались агглютинация эритроцитов и наличие достаточного количества подвижных сперматозоидов.Тест MAR считался положительным и имел клиническое значение, когда наблюдалась агглютинация> 50% [ 1 ]. Преимущества теста MAR заключаются в том, что его можно применять непосредственно к необработанным образцам спермы, а результаты можно получить в течение нескольких минут, что делает анализ быстрым, простым и воспроизводимым. Тест MAR коррелирует с большинством других тестов на антитела к сперматозоидам, например, SIT и IBT [ 22 ]. Хотя тест MAR считается идеальным методом скрининга ASA, он не лишен ограничений [ 30 ].Анализ нельзя использовать у пациентов с олигозооспермией, астенозооспермией и азооспермией. Кроме того, его необходимо проводить на свежем образце, и количественный анализ может быть затруднен из-за наличия мусора, вязкости спермы, слизи и микробных факторов.
В коммерчески доступном наборе MAR сперматозоидов используется антисыворотка против человеческого IgG для индукции смешанной агглютинации между покрытыми антителом латексными шариками, конъюгированными с человеческим IgG [ 24 ]. Набор MAR для сперматозоидов можно считать превосходной альтернативой MAR для эритроцитов, поскольку он эффективен по времени и стоимости (рис. 13,1 ). Один состав набора предполагает оценку классов IgA, а также классов IgG. Анализ может быть успешно использован для оценки партнеров мужского пола в бесплодных парах, если его регулярно включать в анализ спермы [ 36 ]. Непрямой MAR, то есть с использованием образцов сыворотки / семенной плазмы и донорских сперматозоидов, можно рассматривать в случаях с азооспермией. Однако сообщалось, что это трудно интерпретировать. Следовательно, в этих случаях ASA следует обнаруживать, используя другой подход.
Рис.13.1
Положительный тест на смешанную антиглобулиновую реакцию ( MAR ). Сырая проба спермы с латексными шариками, покрытыми IgG, связанными с поверхностями сперматозоидов, в основном с хвостами (фазовый контраст, 40 ×)
13.3.5 Тест Immunobead (IBT)
IBT описывается как относительно простая и недорогая процедура, выполнение которой занимает менее 30 минут. Подобно тесту MAR, он очень удобен, так как в нем используются только настольная центрифуга, световой микроскоп и латексные шарики, покрытые античеловеческими IgG, IgA и IgM [ 14 ].IBT позволяет определить класс антител, прикрепленных к сперматозоидам, локализацию на сперматозоидах и пропорции сперматозоидов, покрытых антителом [ 14 ]. Обнаруженный класс иммуноглобулинов может иметь клиническое значение (рис. 13.2 ).
Рис.13.2
Immunobeads — это полиакриламидные сферы с ковалентно связанными кроличьими античеловеческими иммуноглобулинами. Тест считается положительным, если ≥20% подвижных сперматозоидов имеют связывание с иммунными гранулами, и считается клинически значимым, если не менее 50% подвижных сперматозоидов покрыты иммуно гранулами
Перед проведением анализа сперматозоиды необходимо промыть, чтобы удалить любые свободные иммуноглобулины, которые могут находиться в семенной плазме и которые, если они присутствуют, могут повлиять на результаты анализа.После этого концентрацию сперматозоидов доводят до 10-25 × 10 6 подвижных сперматозоидов / мл для оптимизации микроскопической оценки сперматозоидов. Эти корректировки иногда необходимы, если образец олигозооспермный или астенозооспермический. IBT также может проводиться косвенно на репродуктивных жидкостях, таких как семенная плазма, фолликулярная жидкость, цервикальная слизь, а также сыворотка.
Воспроизводимость непрямого IBT внутри анализа оценивалась путем тестирования аликвот ASA-положительных сывороток от двух пациентов против одного и того же образца донорской спермы.Воспроизводимость результатов между анализами также оценивалась путем тестирования положительного образца сыворотки сначала с разными образцами спермы от одного и того же донора, а затем с образцами спермы от разных доноров. Результаты этих экспериментов показали, что непрямой IBT имеет очень низкую вариабельность внутри анализа и высокую вариабельность между анализами [ 13 ]. Следовательно, как прямой, так и непрямой IBT можно рассматривать как надежные специфические тесты для обнаружения антител, связанных со спермой, и антител к сперматозоидам в репродуктивной жидкости и сыворотке [ 24 ].IBT обычно применялся во многих андрологических лабораториях для обнаружения ASA. Однако в настоящее время нехватка коммерчески доступных латексных шариков с покрытием привела к его прекращению.
13.4 Сравнение тестов ASA
Сравнение между тестом MAR и IBT имеет особое значение, поскольку оба теста, по-видимому, используются наиболее часто [ 37 ]. Два протокола тестирования предназначены для обнаружения иммуноглобулинов на поверхности сперматозоидов; однако тест MAR специфичен для секреторного IgA, присутствующего в сперме, в то время как IBT может перекрестно реагировать с несекреторным IgA, присутствующим в сыворотке [ 29 ].Чтобы инициировать сравнение, непрямые тесты на ASA с использованием коммерчески доступных наборов MAR и IBT были применены к панели сывороток, чьи реакции в TSAT, GAT и SIT были хорошо охарактеризованы. Результаты оценки 30 сывороток подтвердили значительную корреляцию между GAT, MAR и IBT. При титровании сывороток IBT оказался немного более чувствительным, чем GAT, в то время как тест MAR был немного более чувствительным, чем IBT [ 24 ].
Другое сравнительное исследование между тестами IBT и MAR также показало высокую степень согласия между обоими анализами; однако первое было менее точным, чем второе [ 29 ].В аналогичном исследовании сообщается, что стандартный протокол MAR (прямой тест немытой спермы) оказался более чувствительным, чем IBT для промытой спермы. Другие преимущества MAR включают отсутствие необходимости отмывания сперматозоидов от семенной плазмы, что делает его проще и быстрее, чем IBT. Он также использует меньший объем спермы и может применяться к образцам с более низкой концентрацией сперматозоидов по сравнению с IBT [ 2 , 34 ]. Напротив, когда тест MAR проводился на промытой сперме или с непрямым переносом антител из сыворотки или семенной плазмы, результаты давали в основном более низкие значения связывания гранул по сравнению с IBT.Таким образом, тест MAR можно считать наиболее подходящим для прямых анализов с использованием немытых эякулятов, что упрощает его включение в рутинный анализ спермы. Однако было бы благоразумно подтверждать его положительные результаты с помощью IBT [ 20 ].
Исследования перекрестного ингибирования выявили высокую специфичность между положительным IBT и присутствием мембраносвязанного иммуноглобулина. Сообщалось также о хорошей корреляции между IBT и другими иммуноанализами, такими как ПКТ и тесты совместимости сперматозоидов и цервикальной слизи [ 33 ].Сообщалось о плохой корреляции между IBT и тестом на агглютинацию сперматозоидов, что означает, что агглютинация сперматозоидов может происходить из-за других неиммунологических факторов [ 14 ]. Следовательно, при отсутствии АСК при тестах на агглютинацию могут быть получены ложноположительные результаты. Наконец, важно отметить, что есть несколько подводных камней, связанных со сравнением между различными методами обнаружения ASA. Многие методы основаны на субъективных определениях и вариативной подготовке образцов.Кроме того, чувствительность и специфичность каждого метода тестирования сильно различаются [ 19 ].
13.5 Интерпретация и значение тестов ASA
Существует достаточно доказательств, подтверждающих гипотезу о том, что ASA играет роль в отдельных случаях бесплодия. Распространенность и масштабы этой роли до сих пор не определены. В клиническом контексте мужского бесплодия для выявления ASA в настоящее время рекомендуются тест MAR и IBT.Текущий консенсус указывает на то, что образец спермы следует считать иммуно-скомпрометированным, если более 50% сперматозоидов показывают связывание в тесте MAR или IBT [ 1 , 37 ].
Идентификация ASA в данном образце не обязательно указывает на другие внутренние дефекты. Попытка сопоставить результаты теста MAR с другими дефектами семенной жидкости выявила значительную корреляцию между положительным результатом теста MAR и спонтанной аутоагглютинацией сперматозоидов [ 7 ].Однако не наблюдалось корреляции между положительностью теста и концентрацией, подвижностью, морфологией, макроскопическими характеристиками или концентрацией лейкоцитов сперматозоидов. Противоречивые результаты были выявлены в другом исследовании, которое коррелировало результаты теста IgG MAR с параметрами анализа спермы 1176 бесплодных мужчин [ 27 ]. Тест был положительным только в 3,1% случаев. Доказано, что положительный тест на IgG MAR достоверно коррелирует как с количеством, так и с подвижностью сперматозоидов.Связано ли обнаружение ASA с другими недостатками в анализе спермы или нет, не должно влиять на важность анализа, который в некоторых случаях имеет важное значение для определения этиологии бесплодия.
В исследовании, в котором оценивались уровни ASA у мужчин с бесплодием в анамнезе, результаты теста MAR оказались положительными у 10% из 484 мужчин с нормальным количеством сперматозоидов, у 23% из 78 мужчин с низкой подвижностью сперматозоидов и у 15% из 128 с низкими счетами.Следовательно, тест MAR можно рассматривать как часть рутинного анализа спермы, поскольку присутствие антиспермальных антител IgG может быть установлено примерно у 10% мужчин, которые в противном случае могли бы пройти нормально. В подтверждение этого, оценка пациентов, бесплодие которых остается необъяснимым (обычными физическими и лабораторными исследованиями), показывает значительно повышенные уровни АСК у 18% мужчин по сравнению с фертильными людьми. Таким образом, выявление аутоиммунного дисбаланса может помочь разрешить некоторые случаи необъяснимого бесплодия [ 12 ].
13,6 Выводы
Оценка ASA в контексте бесплодия не лишена противоречий. Следует должным образом отметить, что «не существует ни специфического антигена (ов), ни более качественного метода обнаружения антител, хотя оба они необходимы для понимания значимости продукции ASA и для снижения бесплодия» [ 10 ]. Единственным согласованным в настоящее время показанием для проведения анализа на определение ASA является бесплодие необъяснимого характера.Опубликованные данные подтверждают использование IBT или MAR как единственных надежных тестов, способных оценить присутствие ASA в клинических условиях. Тест MAR легче выполнить и может быть более чувствительным, но он не подходит для тестирования сыворотки или плазмы с использованием непрямого подхода.
Список литературы
1.
Акерман С., Макгуайр Г., Фулхэм Д.Л., Александр Н.Дж. (1988) Оценка коммерчески доступного анализа для обнаружения антиспермальных антител. Fertil Steril 49 (4): 732–734 CrossRefPubMed
2.
Ackerman SB, Wortham JW, Swanson RJ (1981) Непрямой иммуноферментный анализ (ELISA) для обнаружения и количественного определения антиспермальных антител. Am J Reprod Immunol 1 (4): 199–205 CrossRefPubMed
3.
Александр Н., Акерман С., Виндт М.Л. (1990) Иммунология. В: Acosta A, Swanson R, Ackerman S et al (eds) Сперматозоиды человека при вспомогательной репродукции. Уильямс и Уилкинс, Балтимор, стр. 208–222
4.
Бронсон Р. (1999) Обнаружение антиспермальных антител: аргумент против терапевтического нигилизма.Hum Reprod 14 (7): 1671–1673 CrossRefPubMed
5.
Бронсон Р.А., Купер Г.В., Розенфельд Д.Л. (1982) Корреляция между региональной специфичностью антиспермальных антител к поверхности сперматозоидов и иммобилизацией сперматозоидов, опосредованной комплементом. Am J Reprod Immunol 2 (4): 222–224 CrossRefPubMed
6.
Cerasaro M, Valenti M, Massacesi A, Lenzi A, Dondero F (1985) Корреляция между прямым тестом на IgG MAR (тест смешанной антиглобулиновой реакции) и семенным анализом у мужчин из бесплодных пар.Fertil Steril 44 (3): 390–395 CrossRefPubMed
7.
Clarke GN, Bourne H, Baker HW (1997) Внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов для лечения бесплодия, связанного с аутоиммунитетом сперматозоидов. Fertil Steril 68 (1): 112–117 CrossRefPubMed
8.
Coombs RR, Marks J, Bedford D (1956) Специфическая смешанная агглютинация: смешанная антиглобулиновая реакция эритроцитов и тромбоцитов для обнаружения антител к тромбоцитам. Br J Haematol 2 (1): 84–94 CrossRefPubMed
9.
Cunningham DS, Fulham DL, Rayl DL, Hansen KA, Alexander NJ (1991) Антиспермальные антитела к поверхностным антигенам сперматозоидов у женщин с инфекцией половых путей. Am J Obstet Gynecol 164 (3): 791–796 CrossRefPubMed
10.
Dondero F, Gandini L, Lombardo F, Salacone P, Caponecchia L, Lenzi A (1997) Обнаружение антиспермальных антител: 1. Методы и стандартный протокол. Am J Reprod Immunol 38 (3): 218–223 CrossRefPubMed
11.
Фичорова Р.Н., Буланов И.Д. (1996) Антитела к семенной плазме, ассоциированные с бесплодием: I.Сывороточные антитела против нормозооспермической семенной плазмы у пациентов с необъяснимым бесплодием. Am J Reprod Immunol 36 (4): 198–203 CrossRefPubMed
12.
Franco JG Jr, Schimberni M, Rojas FJ, Moretti-Rojas I, Stone SC (1989) Воспроизводимость непрямого анализа с помощью иммунных шариков для обнаружения антител к сперматозоидам в сыворотке. J Reprod Med 34 (4): 259–263 PubMed
13.
Franco JG Jr, Schimberni M, Stone SC (1987) Анализ иммунных шариков на антитела к сперматозоидам в сыворотке.Сравнение с традиционными тестами на агглютинацию и иммобилизацию. J Reprod Med 32 (3): 188–190 PubMed
14.
Franken DR, Slabber CF, Grobler S (1983) Тест SCMC: скрининговый тест на антитела к сперматозоидам. Андрология 15 (3): 270–273 CrossRefPubMed
15.
Франклин Р.Р., Dukes CD (1964) Антисперматозойные антитела и необъяснимое бесплодие. Am J Obstet Gynecol 89: 6–9 PubMed
16.
Haas GG Jr, Cunningham ME (1984) Идентификация сперматозоидов, содержащих антитела, с помощью цитофлуорометрии.Fertil Steril 42 (4): 606–613 CrossRefPubMed
17.
Haas GG Jr, D’Cruz OJ (1989) Анализ меченных радиоактивными изотопами антиглобулинов для идентификации иммуноглобулина (Ig) A из цервикальной слизи и антиспермальных антител IgG. Fertil Steril 52 (3): 474–485 CrossRefPubMed
18.
Haas GG Jr, D’Cruz OJ, DeBault LE (1991) Сравнение непрямых иммуноглобулиновых, радиоактивно меченных и иммунофлуоресцентных анализов на антитела иммуноглобулина G в сыворотке к сперматозоиду человека.Fertil Steril 55 (2): 377–388 CrossRefPubMed
19.
Hellstrom WJ, Samuels SJ, Waits AB, Overstreet JW (1989) Сравнение полезности тестов SpermMar и иммунных шариков для обнаружения антиспермальных антител. Fertil Steril 52 (6): 1027–1031 CrossRefPubMed
20.
Isojima S, Tsuchiya K, Koyama K, Tanaka C, Naka O, Adachi H (1972) Дальнейшие исследования иммобилизирующих сперматозоидов антител, обнаруженных в сыворотках необъяснимых случаев бесплодия у женщин.Am J Obstet Gynecol 112 (2): 199–207 CrossRefPubMed
21.
Jager S, Kremer J, van Slochteren-Draaisma T (1978) Простой метод скрининга антиспермальных антител у мужчин-мужчин. Обнаружение IgG на поверхности сперматозоидов с помощью прямой смешанной антиглобулиновой реакции, проводимой на необработанной свежей сперме человека. Int J Fertil 23 (1): 12–21 PubMed
22.
Kallen CB, Arici A (2003) Иммунное тестирование в практике фертильности: правда или обман? Curr Opin Obstet Gynecol 15 (3): 225–231 CrossRefPubMed
23.
Kay DJ, Boettcher B (1992) Сравнение теста SpermMar с принятыми в настоящее время процедурами выявления антител к сперматозоидам человека. Reprod Fertil Dev 4 (2): 175–181 CrossRefPubMed
24.
Ke RW, Dockter ME, Majumdar G, Buster JE, Carson SA (1995) Проточная цитометрия обеспечивает быстрое и высокоточное обнаружение антиспермальных антител. Fertil Steril 63 (4): 902–906 CrossRefPubMed
25.
Kibrick S, Belding DL, Merrill B (1952) Методы обнаружения антител против сперматозоидов млекопитающих.II. Тест на агглютинацию желатина. Fertil Steril 3 (5): 430–438 CrossRefPubMed
26.
La Sala GB, Torelli MG, Salvatore V, Dessanti L, Dall’Asta D, Cantarelli M, Alboni P (1987) Прямой тест IgG-MAR (тест смешанной антиглобулиновой реакции): результаты и корреляция с семенным анализом у 1176 мужчин из бесплодные пары. Acta Eur Fertil 18 (6): 385–390 PubMed
27.
Ли Т.С. (1974) Иммунология спермы, бесплодие и контроль фертильности.Obstet Gynecol 44 (4): 607–623 PubMed
28.
Mahmoud A, Comhaire F (2000) Антиспермальные антитела: использование теста смешанной реакции агглютинации (MAR) с использованием латексных шариков. Hum Reprod 15 (2): 231–233 CrossRefPubMed
29.
Mathur S, Williamson HO, Landgrebe SC, Smith CL, Fudenberg HH (1979) Применение пассивной гемагглютинации для оценки антиспермальных антител и модифицированного теста Кумба для обнаружения мужского аутоиммунитета к антигенам сперматозоидов.J Immunol Methods 30 (4): 381–393 CrossRefPubMed
30.
Мортимер Д. (1994) Клиническая значимость диагностических процедур. В: Мортимер Д. (ред.) Практическая лаборатория андрологии. Oxford University Press, Нью-Йорк, стр. 241–267
31.
Наз Р.К., Менге А.С. (1994) Антиспермальные антитела: происхождение, регуляция и реактивность сперматозоидов при бесплодии человека. Fertil Steril 61 (6): 1001–1013 CrossRefPubMed
32.
Pretorius E, Franken DR, Shulman S, Gloeb J (1986) Тест на контакт со слизью шейки матки и иммунный тест на антитела к сперматозоидам.Arch Androl 16 (3): 199–202 CrossRefPubMed
33.
Rasanen M, Lahteenmaki A, Saarikoski S, Agrawal YP (1994) Сравнение проточного цитометрического измерения семенных антиспермальных антител со смешанной антиглобулиновой реакцией и тестом агглютинации сыворотки. Fertil Steril 61 (1): 143–150 CrossRefPubMed
34.
Румке П. (1974) Происхождение иммуноглобулинов в семенной жидкости. Clin Exp Immunol 17 (2): 287–297 PubMedPubMedCentral
35.
Sinisi AA, Di Finizio B, Pasquali D, Scurini C, D’Apuzzo A, Bellastella A (1993) Распространенность антиспермальных антител с помощью SpermMARtest у субъектов, проходящих стандартный анализ спермы на бесплодие. Int J Androl 16 (5): 311–314 CrossRefPubMed
36.
Виткин С.С., Зеликовский Г., Гуд Р.А., Дэй Н.К. (1981) Демонстрация антитела 11S IgA к сперматозоидам в семенной жидкости человека. Clin Exp Immunol 44 (2): 368–374 PubMedPubMedCentral
37.
Всемирная организация здравоохранения (2010) Лабораторное руководство ВОЗ по исследованию и обработке спермы человека, 5-е изд. WHO Press, Женева, Швейцария
38.
Zini A, Fahmy N, Belzile E, Ciampi A, Al-Hathal N, Kotb A (2011) Антиспермальные антитела не связаны с частотой наступления беременности после ЭКО и ИКСИ: систематический обзор и метаанализ. Hum Reprod 26 (6): 1288–1295 CrossRefPubMed
Взаимодействие с другими людьми
На пути к более точному определению показаний
Было показано, что антитела против сперматозоидов (ASA) снижают мужскую фертильность, но единого мнения о точных ситуациях, в которых следует проводить тесты, нет.Должен ли тест на смешанную антиглобулиновую реакцию (MAR) быть тестом первой линии при расследовании бесплодия? Следует ли проводить его систематически до применения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ)? Каковы факторы риска ASA?
Все пациенты с бесплодием (n = 1364) были протестированы с помощью SpermMar (модифицированный тест MAR) в период с июля 2013 года по июнь 2017 года. Внутри пациента вариабельность теста MAR была также оценена путем сравнения двух тестов в течение одного года у выбранных пациентов (n = 101).
Основным фактором, влияющим на процентное содержание ASA, было наличие или отсутствие агглютинации сперматозоидов.При наличии агглютинаций 27 из 72 (37,5%) пациентов были положительными на АСК по сравнению с 33 из 1292 (2,6%) при отсутствии агглютинаций (P <0,0001). Когда присутствовал один фактор риска (спонтанная агглютинация сперматозоидов, травма мошонки или паховая операция в анамнезе), 33 из 179 (18,44%) тестов были положительными на ASA (≥50% сперматозоидов, покрытых оболочкой), тогда как только 27 из 1242 (2,2%) ) были положительными при отсутствии фактора риска (P <0,0001).
Обнаружение ASA не следует систематически рекомендовать при обследовании статуса фертильности и до начала АРТ, а только в тех случаях, когда при обычном исследовании сперматозоидов обнаруживается агглютинация сперматозоидов, или если у пациента в анамнезе травма мошонки или была сделана паховая операция.
Репродуктивная биомедицина онлайн. 2018, 22 октября [Epub перед печатью]
Николя Гатимель, Джессика Моро, Франсуа Исус, Натали Мойнар, Жан Парино, Роже Ди Леандри
Служба медицинской помощи репродукции, Hôpital Paule de Viguier, CHU Toulouse, 330 авеню де Гранд Бретань, Тулуза 31059, Франция; Université Paul Sabatier Toulouse-III, Groupe de Recherche en Fertilité Humaine (EA 31694, Группа исследований фертильности человека), 330 авеню де Гранд Бретань, Тулуза 31059, Франция.Электронный адрес:., Service de Médecine de la Reproduction, Hôpital Paule de Viguier, CHU Toulouse, 330 авеню де Гранд Бретань, Тулуза 31059, Франция; Université Paul Sabatier Toulouse-III, Groupe de Recherche en Fertilité Humaine (EA 31694, Группа исследований фертильности человека), 330 авеню де Гранд Бретань, Тулуза 31059, Франция.
PubMed http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30409465
% PDF-1.3
%
149 0 объект
>
эндобдж
xref
149 90
0000000016 00000 н.
0000002748 00000 н.
0000002962 00000 н.
0000003014 00000 н.
0000003050 00000 н.
0000003535 00000 н.
0000003602 00000 н.
0000003741 00000 н.
0000003879 00000 п.
0000004018 00000 н.
0000004157 00000 н.
0000004295 00000 н.
0000004434 00000 н.
0000004579 00000 п.
0000004803 00000 п.
0000005339 00000 п.
0000005718 00000 н.
0000006169 00000 н.
0000006206 00000 н.
0000006233 00000 н.
0000006880 00000 н.
0000007149 00000 н.
0000007496 00000 н.
0000007761 00000 н.
0000008275 00000 н.
0000008362 00000 н.
0000008472 00000 н.
0000008580 00000 н.
0000009461 00000 п.
0000010031 00000 н.
0000010594 00000 п.
0000011107 00000 п.
0000011715 00000 п.
0000012286 00000 п.
0000012420 00000 п.
0000012996 00000 п.
0000013213 00000 п.
0000403047 00000 н.
0000414350 00000 н.
0000414619 00000 п.
0000414689 00000 н.
0000415211 00000 н.
0000416528 00000 н.
0000420176 00000 н.
0000420701 00000 н.
0000420951 00000 н.
0000421094 00000 н.
0000421121 00000 н.
0000421421 00000 н.
0000425478 00000 н.
0000425729 00000 н.
0000426222 00000 н.
0000427809 00000 н.
0000428063 00000 н.
0000428418 00000 н.
0000428475 00000 п.
0000428532 00000 н.
0000428589 00000 н.
0000428646 00000 п.
0000428703 00000 н.
0000428760 00000 н.
0000428844 00000 н.
0000428938 00000 н.
0000429068 00000 н.
0000429127 00000 н.
0000429205 00000 н.
0000429265 00000 н.
0000429351 00000 п.
0000429410 00000 п.
0000429495 00000 н.
0000429555 00000 н.
0000429686 00000 н.
0000429746 00000 н.
0000429856 00000 н.
0000429916 00000 н.
0000430053 00000 н.
0000430172 00000 н.
0000430231 00000 п.
0000430331 00000 п.
0000430453 00000 п.
0000430512 00000 н.
0000430572 00000 н.
0000430676 00000 н.
0000430736 00000 н.
0000430857 00000 п.
0000430916 00000 н.
0000431061 00000 п.
0000431120 00000 н.
0000431179 00000 н.
0000002096 00000 н.
трейлер
] >>
startxref
0
%% EOF
238 0 объект
> поток
xb«b`b`c` ̀
Антиспермальные антитела — Использование теста смешанной реакции агглютинации (MAR) с использованием латексных шариков
Вопрос исследования:
Есть ли какая-либо связь между положительностью теста на смешанную антиглобулиновую реакцию (MAR) и клиническими особенностями или значениями параметров ультразвукового исследования половых путей (УЗИ) у мужчин бесплодных и фертильных пар?
Изучите ответ:
У мужчин бесплодных и фертильных пар положительность теста MAR была связана с клиническими и ультразвуковыми признаками, указывающими на хроническое воспаление придатка яичка.Что уже известно:
Положительные результаты теста MAR чаще наблюдались у мужчин бесплодных пар, чем у фертильных мужчин. Положительный тест MAR был обнаружен у мужчин с историей повреждения яичек или пост-яичек. Ни одно из предыдущих исследований не сообщало об изменениях в США, связанных с положительностью теста MAR. Это первое исследование, в котором систематически оценивалась связь между положительным результатом теста MAR и клиническими, семенными и УЗ-характеристиками всего мужского полового тракта.
Дизайн, размер, продолжительность исследования:
Этот перекрестный анализ включал 109 фертильных мужчин и 699 последовательных субъектов, обращавшихся за медицинской помощью по поводу бесплодия пар с сентября 2012 года по сентябрь 2017 года.Участники / материалы, постановка, методы:
Все пациенты прошли в нашей амбулаторной клинике полное физическое, эндокринное, мошоночное и трансректальное УЗИ и анализ спермы (включая sIL-8) в один и тот же день. Из 699 мужчин бесплодных пар 181 (возраст 38,6 ± 6,6 года) прошел тест MAR, тогда как тест можно было оценить у всех 109 фертильных мужчин (возраст 36,6 ± 5,2 года). Связь между положительностью теста MAR и другими изучаемыми параметрами была исследована на группе из 290 мужчин (пациенты + фертильные мужчины) и в двух когортах мужчин из бесплодных и фертильных пар.Основные результаты и роль случая:
Из 181 изученного мужчины бесплодных пар у 20 (11%) был положительный тест на MAR, в том числе у 12 (6,6%), у которых был тест MAR ≥ 50%, что считается патологическим порогом согласно ВОЗ. Из 109 фертильных мужчин четверо (3,7%) имели положительный тест на MAR, из которых один (0,9%) имел тест на MAR ≥ 50%. Таким образом, положительный результат теста MAR чаще обнаруживался у мужчин из бесплодных пар (P <0,05). Во всей выборке (n = 290) мужчин как бесплодных, так и фертильных пар не наблюдалось корреляции между положительностью теста MAR и семенными характеристиками.Положительный тест MAR был связан с аномалиями УЗИ придатка яичка, особенно со средним размером тела и хвоста придатка (оба P <0,0001), а у бесплодных мужчин положительный тест MAR также был связан с аномальной эхотекстурой придатка яичка. Кроме того, у субъектов с положительным тестом MAR чаще наблюдались эпидидимит в анамнезе и высокие уровни sIL-8. Что касается эндокринных параметров, наблюдалась только положительная корреляция между положительностью теста MAR и уровнями ЛГ, даже после поправки на возраст и факторы образа жизни (прил.r = 0,232, P <0,0001), при этом не было обнаружено никакой связи с уровнями тестостерона и ФСГ. Ограничения, поводы для осторожности:
Антиспермальные антитела (ASA) были обнаружены в этом исследовании с помощью теста SpermMAR IgG, но доступны и другие тесты. Кроме того, по техническим причинам тест MAR не может быть оценен у субъектов с тяжелой олиго-астено-зооспермией, и, следовательно, этот тест может привести к внутренней систематической ошибке отбора. Наконец, из-за перекрестного характера исследования нельзя вывести ни гипотезу причинности, ни механистические модели.Более широкое значение результатов:
Во-первых, наши результаты показывают, что положительность теста MAR связана с клиническими и ультразвуковыми признаками, указывающими на хроническое воспаление придатка яичка, а не на повреждение яичек. Следовательно, при обследовании субъекта с положительным тестом MAR необходимо оценивать придаток яичка, а не только яичко. Более того, положительный результат теста MAR чаще выявлялся у мужчин бесплодных пар, чем у фертильных мужчин, но он не был связан с обычными значениями параметров спермы.Наши данные подтверждают роль ASA в бесплодии пары, независимо от обычного анализа спермы. Вопрос о том, как ASA влияет на фертильность пары, требует дальнейших исследований. Финансирование исследования / конкурирующие интересы:
Гранты были получены от Министерства университетских и научных исследований (проект SIR для F.L., номер протокола: RBSI14LFMQ). Там нет конфликта интересов. Регистрационный номер исследования:
Нет данных.
Почему они образуются, Тесты для диагностики, Лечение
Как следует из названия, антиспермальные антитела борются со спермой.Это происходит, когда иммунная система ошибочно нацелена на сперматозоиды в мужской сперме как на захватчика и повреждает или убивает их.
Антиспермальные антитела встречаются нечасто. Их могут делать и мужчины, и женщины. Они могут затруднить парам зачатие ребенка. Но сами по себе антитела редко делают невозможным беременность.
Причины
У мужчин инфекция простаты или повреждение яичек могут вызвать иммунный ответ, когда сперма вступает в контакт с кровью.Это также может произойти после операции на яичке, такой как вазэктомия.
В организме женщины могут вырабатываться антиспермальные антитела, если у них есть аллергическая реакция на сперму. Антитела во влагалище женщины убивают сперму. Это случается редко, и врачи не знают, почему это происходит.
Следует ли вам пройти тестирование?
Если вам и вашему партнеру трудно забеременеть, ваш врач может порекомендовать тесты на фертильность, включая проверку на антиспермальные антитела.
Продолжение
Для женщин это можно сделать с помощью теста на иммобилизацию сперматозоидов с образцом крови.Реже врач может проверить цервикальную слизь на наличие антиспермальных антител.